耗费制备单细胞悬液几个小TIPS包教包会
时间: 2025-01-10 23:40:31 | 作者: 输送设备
、胚胎、神经、乳腺、干细胞等，而其间样本的处理消化亦是重中之重，样本前处理与后续的剖析成果有着极大的相关。耗费在上机前得到最*的悬液呢？这儿和大家伙儿一起来共享一些制备*单细胞悬液的
在样本收集进程中，主张选用无菌样品解决办法，包含运用不含核酸酶的试剂和耗材；
实体安排需求先处理，传统安排处理办法有机械法，包含网搓法、研磨法。机械法一般适用样本类型为脾脏、淋巴结、胸腺；别的较温文的办法有酶解法（运用胰蛋白酶类、胶原酶、溶菌酶、弹性蛋白酶以及一些商业化包装的组合酶），适用样本类型有肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脊髓、脑、肠道、皮肤、肿瘤等。
假如您运用的是10x Genomics相关仪器和借题发挥，能够从官网检查10x Genomics不同样本单细胞悬液制备官方主张或许使用关键词查询与自己样本类型相同的已宣布的单细胞测序文献。关于耗费取得高质量的样品，10X公司主张在单细胞悬液制备进程中，细胞重悬的缓冲液选用无Ca2+、Mg2+和EDTA的1× PBS，并用0.04% non-acetylated BSA清洗两次（300rcf，5min），挑选其他缓冲液或培养基或许会对成果发生不同程度的影响。
细胞在处理进程遭到外界环境影响，其基因表达谱有极大几率会呈现一些改变；有些细胞对环境极为灵敏，或许会逝世裂解，形成RNA降解然后形成检测中的布景细胞升高，从而影响所取得的数据质量。试验进程中需求尽或许防止细胞逝世，一直在优化细胞处理条件，加速试验流程的进展，减小对细胞的影响。
单细胞悬液制备进程中呈现的细胞团、细胞碎片或纤维等杂质会添加微流体芯片的阻塞危险。假如存在细胞碎片和大团块，请将样品经过40 µm Flowmi细胞过滤器，细胞悬液体积丢失小。
